杭州浩克生物項(xiàng)目介紹
原位雜交技術(shù)(In situ hybridization，ISH)是利用核酸分子互補(bǔ)配對(duì)使雜交探針可以特異性結(jié)合于組織或細(xì)胞中目標(biāo)核酸分子，再通過(guò)探針帶有的地高辛或者熒光標(biāo)記物，特異性鑒定、檢測(cè)目標(biāo)核酸分子的相對(duì)含量以及在組織細(xì)胞中的定位。因此原位雜交可以在組織或細(xì)胞原有結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)之上(組織切片或細(xì)胞)，檢測(cè)某種基因的有無(wú)，定位及半定量。熒光標(biāo)記探針進(jìn)行原位雜交即為FISH(Fluorescence in situ hybridization)，可以替代放射標(biāo)記物，靈敏度高、實(shí)驗(yàn)效率高。
應(yīng)用
原位雜交可以定性檢測(cè)組織細(xì)胞中的mRNA、lncRNA、circRNA，也可以定位及分析染色質(zhì)中的基因。利用特異性16s RNA探針還可以簡(jiǎn)單樣品中的細(xì)菌、古細(xì)菌，還可以通過(guò)特意探針鑒定組織細(xì)胞中的病毒。FISH能夠用來(lái)檢測(cè)或確認(rèn)基因或染色體是否異常，醫(yī)學(xué)和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測(cè)非整倍體、基因重排、拷貝數(shù)變異等。
樣本保存運(yùn)輸
組織冰凍切片
組織切取需要部位，厚度在2mm 左右, PBS 漂洗，干冰運(yùn)輸或立即置于固定液中。組織固定有原位雜交固定液(動(dòng)物)、原位雜交固定液(植物)、原位雜交固定液(較嫩植物)，室溫固定12 小時(shí)(根據(jù)組織大小)以上，植物組織固定時(shí)需常溫抽真空30min，再用純水或PBS 清洗兩次后， 放入15% 蔗糖溶液中，4℃脫水8 小后，換30% 蔗糖溶液4℃過(guò)夜。冰切時(shí)佩戴手套。冰凍切片放-20℃或-80℃ 保存?zhèn)溆谩?/p>
組織石蠟切片
組織切取需要部位，厚度在2mm 左右, PBS 漂洗后立即固定。動(dòng)物組織用原位雜交固定液(動(dòng)物)，植物組織用原位雜交固定液(植物)或原位雜交固定液(較嫩植物)，植物組織固定時(shí)需常溫抽真空30min，固定12h 以上。固定完成后脫水、包埋、切片。梯度酒精配制需用DEPC 水。石蠟常規(guī)保存?zhèn)溆谩?/p>
標(biāo)本運(yùn)輸
冰凍切片：標(biāo)本放原位雜交固定液中，常溫運(yùn)輸;冰凍切片-20℃運(yùn)輸;新鮮組織干冰運(yùn)輸。交接單隨樣本一起，單獨(dú)封裝。
石蠟切片：標(biāo)本放原位雜交固定液中，常溫運(yùn)輸;石蠟切片常溫運(yùn)輸。交接單隨樣本一起，單獨(dú)封裝。
細(xì)胞爬片：細(xì)胞爬片加原位雜交固定液后密封4℃運(yùn)輸。交接單隨樣本一起，單獨(dú)封裝。
DEPC 水配制
純水中加入0.1%DEPC 原液震蕩攪拌2h 后靜置過(guò)夜后高壓滅菌，有效滅菌時(shí)間30min 以上，或直接購(gòu)買。
結(jié)果展示
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價(jià)格列表
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服務(wù)項(xiàng)目 價(jià)格 Tunel（白光）檢測(cè) 200元/張 Tunel（熒光）檢測(cè) 200元/張 IF Tunel 雙染 250元/張 Tunel( 芯片） 550元/張 原位雜交（DAB 顯色） 240元/張 原位雜交（FISH 單標(biāo)） 240元/張 原位雜交（FISH、IF 雙染） 300元/張 原位雜交（FISH 雙標(biāo)） 300元/張 原位雜交（FISH 三標(biāo)） 350元/張 原位雜交（芯片） 500 元起 探針設(shè)計(jì)合成（一端標(biāo)記、BIO） 600元/條 探針設(shè)計(jì)合成（一端標(biāo)記、DIG） 1000 元 / 條 探針設(shè)計(jì)合成（一端標(biāo)記、FAM） 1100 元 / 條 探針設(shè)計(jì)合成（一端標(biāo)記、Cy3） 1900 元 / 條 探針設(shè)計(jì)合成（兩端標(biāo)記、BIO） 1200 元 / 條 探針設(shè)計(jì)合成（兩端標(biāo)記、DIG） 1690 元 / 條 探針設(shè)計(jì)合成（兩端標(biāo)記、FAM） 1400 元 / 條 探針設(shè)計(jì)合成（兩端標(biāo)記、Cy3） 2500 元 / 條
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