【產(chǎn)品信息】

【產(chǎn)品簡介】

RNA快速雜交試劑盒，適用于大于300bp的rna原位雜交，該試劑盒具有簡易快速的操作流程，能顯著縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。其特色在于采用多組觸發(fā)探針。當(dāng)探針與靶序列結(jié)合后，會暴露擴(kuò)增序列從而引發(fā)樹枝狀雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（HCR），形成巨大的核酸聚合物。每條核酸鏈均標(biāo)記有地高辛（DIG），可通過抗體檢測實(shí)現(xiàn)顯色可視化。

【組織固定】

【儲存與運(yùn)輸】

冰袋（wet ice）運(yùn)輸；-20℃長期保存,短期于4℃保存，有效期6個(gè)月。

【使用方法】

1. 脫蠟至水

依次將切片放入二甲苯Ⅰ15 min-二甲苯Ⅱ15 min-二甲苯Ⅲ15 min-無水乙醇10 min-90%酒精10 min-80%酒精10 min -70%酒精10 min -純水沖洗。

2. 修復(fù)

細(xì)胞樣本：等待切片完全干燥后，用組畫筆（推薦HKR14P原位雜交專用組畫筆）畫出大小合適的疏水圈，在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片。將100ul蛋白酶K修復(fù)液(1X)滴于組織上，37℃孵育10min，純水沖洗終止反應(yīng)。

冰凍切片：細(xì)胞樣本：等待切片完全干燥后，用組畫筆（推薦HKR14P原位雜交專用組畫筆）畫出大小合適的疏水圈，在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片。將100ul蛋白酶K修復(fù)液(1X)滴于組織上，37℃孵育20min（冰凍切片），純水沖洗終止反應(yīng)。

石蠟切片：將裝入玻片的玻片架放入修復(fù)槽，倒入1x檸檬酸6.0修復(fù)液（樣本區(qū)域須被浸沒），蓋上蓋子，用膠帶紙封住，放入微波爐中，中火8min，停8min，中低火8min。自然冷卻降溫后，用3%雙氧水封閉15min。

3. 封閉

取出切片，甩干切片上的液體，用組畫筆（推薦HKR14P原位雜交專用組畫筆）畫出大小合適的疏水圈，在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片，每張切片滴加100ul封閉液，37℃孵育30min，洗滌1次，每次5min。洗滌步驟：將裝入玻片的玻片架放入洗液缸，倒入洗液（樣本區(qū)域須被浸沒），置于搖床上5min，轉(zhuǎn)速為60。

4. 探針雜交

甩干切片上的液體，每張切片滴加100ul的快速探針，37℃孵育2h-3h，注意保持濕度以防干片。洗滌5次，每次5min。洗滌步驟：將裝入玻片的玻片架放入洗液缸，倒入洗液（樣本區(qū)域須被浸沒），置于搖床上5min，轉(zhuǎn)速為60。

5. HRP-鼠抗地高辛

甩干切片上的液體，每張切片滴加100ul的HRP-鼠抗地高辛（1x），37℃濕盒孵育40min；洗滌5次，每次5min。洗滌步驟：將裝入玻片的玻片架放入洗液缸，倒入洗液（樣本區(qū)域須被浸沒），置于搖床上5min，轉(zhuǎn)速為60。

6. 顯色

甩干切片上的液體，每張切片滴加100ul的TSA顯色液，室溫孵育10min。純水沖洗，終止反應(yīng)。

7. DAPI染核

每張切片滴加50ul DAPI染液，避光孵育5min，純水沖洗后滴加抗熒光淬滅封片劑封片。

【注意事項(xiàng)】

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

本產(chǎn)品僅作科研用途。

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