免疫組化 分子病理 實驗服務 免疫組化雙染（芯片）免疫組化 分子病理 實驗服務 價格￥300單位張貨號HKF2026品牌浩克 QQ53383090 咨詢購買 產(chǎn)品介紹產(chǎn)品參數(shù)資料下載 【產(chǎn)品信息】 產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格價格免疫組化雙染（芯片）HKF2026張300元實驗原理免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(shù)(IHC)或免疫細胞化學技術(shù)(ICC)。?實驗步驟1.?石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min?-無水乙醇Ⅰ6min-?95%酒精6min- 85%酒精6min，自來水洗2min。2.?抗原修復：組織切片置于盛滿抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復，中火8min至沸騰?；?br>8min再轉(zhuǎn)中低火7min，此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。3.?阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。4.?畫圈：用組化專用的組化筆沿著組織外圍輪廓畫一個與組織間隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保證后續(xù)依次加入的封閉血清，一抗，二抗，以及顯色劑能完全覆蓋組織，而不沿著玻片流走。5.?血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。6.?加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒4°過夜孵育。7.?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與超敏兔鼠通用二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min。8.?顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加解凍的TY反應液反應20min，然后PBS洗三次，之后加入紅色顯色液工作液（PB:CU:紅色色原：AC=860:40:1:100），顯微鏡下控制顯色時間，陽性為紅色，純水沖洗切片終止顯色。(時間較長15min左右)，再重復2-7的操作步驟。9.?抗原修復：組織切片置于盛滿抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復，中火8min至沸騰?；?br>8min再轉(zhuǎn)中低火7min，此過程中應防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。10.?阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。11.?畫圈：用組化專用的組化筆沿著組織外圍輪廓畫一個與組織間隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保證后續(xù)依次加入的封閉血清，一抗，二抗，以及顯色劑能完全覆蓋組織，而不沿著玻片流走。12.?血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。13.?加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒4°過夜孵育。14.?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與超敏兔鼠通用二抗（HRP標記）覆蓋組織，室溫孵育50min。15.?DAB顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加（稀釋液和濃縮液1000:50配制）新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下控制顯色時間，陽性為棕黃色，純水沖洗切片終止顯色。16.?復染細胞核：蘇木素染色2-3mins左右，自來水洗，蘇木素分化液分化2秒，自來水沖洗，蘇木素返藍液返藍15-30s，流水沖洗。17.?脫水封片：將切片依次放入75%酒精5min-85%酒精5min -95%酒精5min -無水乙醇5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min 中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來稍晾干，中性樹膠封片。18.?顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結(jié)果判讀：蘇木素染出細胞核為藍色，DAB顯出的陽性表達為棕黃色，紅色顯色試劑呈粉紅色注意事項：1．注意切片脫蠟是否徹底；2．實驗過程中切片勿干片；3. ? 實驗操作中小心槍頭掛傷組織。 無 暫無 說明文檔下載說明書.pdf 上一篇: IF+TUNEL雙染下一篇: IHC+普魯士藍（或其他化學染料） 推薦 阿利新藍-茜素紅胎鼠染色 2024年12月4日 1982 實驗原理 該染色項目是對骨和軟骨進行染色以觀察脊椎動物骨骼在生理和病理狀態(tài)下的改變，阿利新藍是一種含銅離子的苯二甲藍染料... 查看全文 剛果紅染色 2024年12月4日 1290 服務介紹： 淀粉樣蛋白對剛果紅有選擇親和力，因此容易著染。據(jù)認為剛果紅是一種分子為長線狀的偶氮染料，其上的氨基容易和淀粉樣蛋白的... 查看全文 鈣鹽染色 2024年11月28日 1919 【產(chǎn)品信息】 無 暫無 查看全文 SDH染色 2024年12月4日 1800 暫無 查看全文
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